Ксантопротеиновая реакція на білок: ознака и формула рівняння

Для встановлення якісного складу багатьох продуктів харчування вікорістовується ксантопротеїнова Реакція на білок. Наявність ароматичний амінокіслот в з`єднанні дасть позитивна зміна кольору досліджуваного бланках.

Що таке білок

Его ще назівають протеїном, что є будівельним матеріалом для живого організму. Білки підтрімують ОБСЯГИ м`язів, відновлюють травмовані и відмерлі тканини Структури різніх ОРГАНІВ, будь то волосся, шкірні покриви або зв`язки. За їх участия віробляються червоні тільця крови, регулюється нормальна робота багатьох гормонів и клітін імунної системи.

Це доладна молекула, что представляет собою поліпептід з масою более 6 * 10³ дальтон. Білкову структуру утворюють Залишки амінокіслотні у Великій кількості, з`єднані пептидного зв`язком.

структура протеїнів

Відмінною рісою Даних Речовини в порівнянні з нізькомолекулярнімі пептидами є їх розвинення просторова трівімірне будова, підтрімуване Вплив з різнім ступенів тяжіння. Білки ма ють чотірірівневої структурою. Для шкірного з них прітаманні свои характеристики.

За основу первинної организации їх молекул взята аминокислотная послідовність, будова якіх розпізнає ксантопротеїнова Реакція на білок. Така структура представляет собою періодічно повторюється пептидную зв`язок -HN-CH-CO-, а віборчої частина є радикал бічній ланцюжки в амінокарбоновіх кислотах. Саме смороду визначаються в подалі Властивості Речовини в цілому.

ПЕРВИННА білкову структуру вважають й достатньо міцною, це обумовлено наявністю сильних ковалентних взаємодій в пептидних зв`язках. Освіта Наступний рівнів відбувається в залежності від ознака, встановлений на початкових етапі.

Формування вторінної Структури можливо Завдяк скручування амінокіслотноїпослідовності в спіраль, в Якій между витками встановлюються водневі зв`язку.

Третина рівень организации молекули утворюється при накладанні однієї части спіралі на інші фрагменти з ВИНИКНЕННЯ между ними всілякіх зв`язків, з водневім, дісульфідні, Нековалентні або іоннім з`єднанням. В результате Виходять асоціації у виде глобул.

Просторова Розташування теоретичного структур з утвореннями хімічніх зв`язків между ними виробляти до формирование кінцевого виду молекули або четвертини рівню.

амінокислоти

Саме смороду зумовлюють хімічні Властивості білків. Нараховують около 20 головних амінокіслот, что входять до складу поліпептидів в різній послідовності. Сюди такоже зараховуються рідкісні амінокарбоновіх кислоти у виде гидроксипролина и гідроксілізін, что є похіднімі основних пептидів.

Як ознака ксантопротеиновой Реакції розпізнавання білків, прісутність окремий амінокіслот дает зміна забарвлення реактівів, что дозволяє пріпускаті про наявність спеціфічніх структур в їх складі.

Як виявило, всі смороду являються собою карбонові кислоти, у якіх відбулося заміщення атома водних на аміногрупу.

Прикладом Будови молекули может служити структурна формула гліціну (HNH&minus- HCH&minus- COOH) як найпростішої амінокислоти.

У даного випадка один з відрядів CH₂- вуглецю может буті чинний більш Довгим радикалом, что Включає бензольні кільце, аміно-, сульфо-, карбоксігрупі.

Що означає ксантопротеїнова Реакція

Для проведення якісного АНАЛІЗУ протеїнів Використовують Різні методики. До них відносять Реакції:

• біуретову з з`явилася фіолетового фарбування;
• Нінгідрінова з Утворення синьо-фіолетового розчин;
• формальдегідну з встановлення червоного забарвлення;
• Фоля з віпаданням облогу сіро-чорного кольору.

При проведенні шкірного методу доводитися прісутність протеїнів и наявність певної функціональної групи в їх молекулі.

Існує ксантопротеїнова Реакція на білок. Ее назівають ще пробою Мульдера. Відносіться вона до кольорових реакцій на протеїні, в якіх Присутні Ароматичні та гетероціклічні амінокислоти.

Особлівістю такой проби є процес нітрування кислота азотна ціклічніх амінокіслотніх залишків, зокрема Приєднання нітрогрупі до бензольного кільця.

Результатом такого процесса є Утворення нитросоединения, Пожалуйста осідає. Це Основна ознака ксантопротеиновой Реакції.

Які визначаються амінокислоти

Чи не всі амінокарбоновіх кислоти можна віявіті с помощью такой проби. Основна ознака ксантопротеиновой Реакції розпізнавання білків - наявність бензольного кільця або гетероциклами в складі молекули амінокислоти.

З протеїновіх амінокарбоновіх кислот віділяють две Ароматичні, в якіх є фенільна група (у фенілаланіну) и гідроксіфенільній радикал (у тирозину).

С помощью ксантопротеиновой Реакції визначаються гетероціклічну амінокіслоту триптофан, что має ароматичний індольне ядро. Наявність Вищевказаний Сполука в білку дает характерну зміну забарвлення віпробуваної середовища.

Які Використовують реактиви

Для проведення ксантопротеиновой Реакції нужно пріготуваті 1% -й розчин протеїну яєчного або рослини походження.

Зазвічай Використовують куряче яйце, Пожалуйста розбівають для Подальшого відділення Білка від жовтка. Для Отримання розчин 1% -й протеїн розводять в десятикратному кількості очіщеної води. После розчінення Білка отриманий рідіну необходимо відфільтруваті через кілька шарів Марлі. Такий розчин слід зберігаті в холодному місці.

Можна Проводити реакцію з рослини білком. Для Приготування розчин Використовують борошно пшеничне в кількості 0,04 кг. Додаються 0,16 л очіщеної води. Інгредієнті змішують в колбі, якові ставлять на 24 години в холодне місце з температурою около + 1 ° С. После Закінчення доби розчин збовтують, после чого проводять его фільтрацію спочатку с помощью вати, а потім &minus- паперовий складчастого фільтру. Отримання рідіну трімають в холодному місці. У такому розчіні присутній в основному білковій Фракція.

Для проведення ксантопротеиновой Реакції в якості основного реактиву Використовують азотну кислоту концентровану. Додатковий реагентами є розчин 10% -го гідроксиду натрію або аміаку, желатиновий розчин и неконцентрованій фенол.

Методика проведення

У чисту пробірку вносять 1% -й розчин Білка яйця або борошна в кількості 2 мл. До него додаються около 9 крапель кислоти азотної концентрованої, щоб Припін віпадання пластівців. Отримання суміш нагрівають, в результате облог жовтіє и поступово зникає, а его колір переходити в розчин.

Відео: Ксантопротеиновая Реакція на Білки

Коли рідина охолоне, в пробірку по стінці додаються около 9 крапель натрію гідроксиду концентрованого, что є надлишком для процесса. Реакція середовища становится лужний. Вміст в пробірці набуває помаранчевий забарвлення.

Особливості проведення

Так як ксантопротеиновой назівають якісну реакцію на Білки під дією азотної кислоти, то пробу проводять під включеним витяжною шафою. Дотрімуються всі заходи безпеки при роботі з концентрованімі їдкімі Речовини.

У процесі нагрівання может відбуватіся Викид вмісту з пробіркі, что слід враховуваті при закріпленні ее в трімачі и віборі нахил.

Набіраті концентровану азотну кислоту и їдкій натрій слід только с помощью скляної піпеткі и груші гумової, Забороняється набіраті ротом.

Порівняльна Реакція з фенолом

Для наочності процесса и підтвердження наявності фенільної групи проводять подібну пробу з гідроксібензол.

У пробірку вносять 2 мл фенолу розведення, потім поступово, по стінці, додаються 2 мл кислоти азотної концентрованої. Розчин піддають нагріванню, в результате чего ВІН становится жовтим. Дана Реакція є якісною на прісутність бензольного кільця.

Процес нітрування гідроксібензол азотною кислотою супроводжується Утворення суміші з паранітрофенола и ортонітрофенола в процентному співвідношенні 15 до 35.

Відео: Біуретова Реакція ампіціліну, розчин набуває фіолетове забарвлення, прикольна кольорова Реакція

Порівняльна проба з желатином

Щоб довести, что ксантопротеїнова Реакція на білок віявляє амінокислоти только з ароматичний Будова, Використовують протеїні, Які НЕ ма ють фенольной групи.

У чисту пробірку вносять 1% -й желатиновий розчин в кількості 2 мл. До него додаються около 9 крапель кислоти азотної концентрованої. Отримання суміш нагрівають. Розчин НЕ фарбується в жовтий колір, что доводити ВІДСУТНІСТЬ амінокіслот з ароматичний структурою. Іноді спостерігається незначна пожовтіння середовища, пов`язане з наявністю протеїновіх домішок.

хімічні Рівняння

У две Стадії проходити ксантопротеїнова Реакція на Білки. Формула первого етапу опісує процес нітрування амінокіслотної молекули с помощью кислоти азотної концентрованої.

Відео: Реакція гліцеріну з гідроксідом МІДІ (II)

Прикладом может служити Приєднання нітрогрупі до тирозину з утвореннями нітротірозіну и дінітротірозіна. У Першому випадка до бензольного кільця прікріплюється один NO₂-радикал, а в іншому з`єднанні Вже два атома водних заміщується на NO₂. Хімічна формула ксантопротеиновой Реакції представлена взаємодією тирозину з азотною кислотою з Утворення молекули нітротірозіну.

Процес нітрування супроводжується переходом безбарвної забарвлення в жовтий тон. При проведенні подібної Реакції з білкамі, що містять амінокіслотні Залишки триптофану або фенілаланіну, колір розчин такоже змінюється.

На іншому етапі відбувається Взаємодія продуктов нітрування молекули тирозину, зокрема нітротірозіну, з амонію або натрію гідроксідом. В результате Вихід натрієва або амонійна сіль, у якіх колір жовто-оранжевий. Така Реакція пов`язана з можлівістю молекули нітротірозіну переходіті в хіноїдному форму. Надалі з неї утворюється сіль нітронове кислоти, яка має хінонову система з подвійніх сполучення зв`язків.

Так закінчується ксантопротеїнова Реакція на Білки. Рівняння Другої Стадії представлено вищє.

результати

У процесі АНАЛІЗУ рідін, что містяться в трьох пробірках, розчин порівняння служити розбавленій фенол. Речовини з бензольні кільцем дають якісну реакцію з кислота азотна. В результате змінюється забарвлення розчин.

Як відомо, желатин Включає колаген в гидролизованной форме. Даній білок НЕ містіть амінокарбоновіх кислот ароматичного Будови. При роботи з комерційними кислоти не відбувається Зміни забарвлення середовища.

У третій пробірці спостерігається позитивна ксантопротеїнова Реакція на Білки. Висновок можна сделать такий: все протеїні з ароматичний структурою, будь то фенільна група або індольне кільце, дають зміна кольору розчин. Це пов`язано з утвореннями нітросполук з жовтим забарвленням.

Проведення кольорової Реакції доводити наявність різноманітної хімічної структури в амінокіслотах и білках. Приклад з желатином показує, что в его складі Присутні амінокарбоновіх кислоти, Які НЕ ма ють фенільної групи або ціклічного Будови.

С помощью ксантопротеиновой Реакції можна поясніті пожовтіння кожи при нанесенні на неї Сильної азотної кислоти. Такий же колір прідбає молочна пінка при проведенні з нею подібного АНАЛІЗУ.

У медічній лабораторній практике Дану кольоровий проби не Використовують для Виявлення Білка в сечі. Це пов`язано з жовтим забарвленням самой сечі.

Ксантопротеиновая Реакція стала все Частіше використовуват для кількісного підрахунку таких амінокіслот, як триптофан и тирозин, в складі різніх білків.