Серологічні реакції: види, использование
Відео: імунологія
Лабораторна діагностика практично всех інфекційніх захворювань засновано на віявленні в крови хворого Антитіл, Які віробляються на антигени Збудник, методами серологічніх реакцій. Смороду увійшлі в лікарську практику з кінця дев`ятнадцятого - качана двадцятого століття.
Розвиток науки допомогло візначіті антигенну структуру мікробів и хімічні формули їх токсінів. Це дозволило создать НЕ только лікувальні, но и діагностичні Сироватко. Їх отримуються Шляхом Введення ослаблених збудніків лабораторним тваринам. После кількох днів Витяг з крови кроликів або мишей готують препарати, Які Використовують для ідентіфікації мікробів або їх токсінів, вікорістовуючі серологічні Реакції.
Зовнішній прояв такой Реакції Залежить від умов ее постановки и від стану антігенів в крови хворого. Если частинка мікробів нерозчінні, то смороду осідають, лизируются, зв`язують або мобілізують в сіроватці. Если антигени розчінні, то віявляється феномен нейтралізації або преціпітації.
Відео: Провокація в бою, использование Реакції суперники. Олександр Чичварин
Реакція аглютінації (РА)
Серологічна Реакція аглютінація є вісокоспеціфічній. Вона проста у віконанні и й достатньо наочно, щоб Швидко візначіті наявність антігенів в сіроватці крови хворого. Ее Використовують для постановки Реакції Відаля (діагностика черевного тифу и паратіфів) и Вейгля (вісіпній тиф).
Вона засновано на спеціфічній взаємодії между антітіламі людини (або агглютининами) и мікробнімі клітінамі (агглютеногенамі). После їх взаємодії утворюються частинка, Які віпадають в облог. Це и є позитивна ознака. Для постановки Реакції могут використовуват живі або вбіті мікробні агенти, гриби, найпростіші, Клітини крови и соматичні Клітини.
Хімічно Реакція Розбита на два етапи:
- Спеціфічне з`єднання Антитіл (АТ) з антигенами (АГ).
- Неспеціфічна - осадженим конгломератів АГ-АТ, тобто освіту агглютіната.
Реакція непрямої аглютінації (РПГА)
Дана Реакція має більшу чутлівість, чем попередня. Ее Використовують для діагностування захворювань, что віклікаються бактеріямі, внутрішньоклітіннімі паразитами, найпростішімі. Вона настолько спеціфічна, что дозволяє віявіті даже очень низька концентрацію Антитіл.
Для ее постановки Використовують очіщені баранячі еритроцити и червоні кров`яні тільця людини, Попередньо оброблені антітіламі або антигенами (це Залежить від того, что именно лаборант хоче найти). У Деяк випадка Людські еритроцити обробляють імуноглобулінамі. Серологічні Реакції еритроцитів вважаються такими, что відбуліся, если відбулося їх осадженим на дно пробіркі. Про позитивну реакцію можна Говорити, коли Клітини розташовуються у виде перевернутого парасольки, займаючі все дно. Негативна Реакція зараховується, если еритроцити осілі стовпчики або у виде гудзики в центрі дна.
Реакція преціпітації (РП)
Серологічні Реакції цього типу служать для Виявлення Вкрай малих частінок антігенів. Це могут буті, например, Білки (або їх части), з`єднання білків з ліпідамі або вуглеводи, части бактерій, їх токсинів.
Сироватко для проведення Реакції отримуються Шляхом штучного зараження тварин, зазвічай кроликів. Таким методом можна получит абсолютно будь-яку преціпітуючіх Сіроватку. Постановка серологічніх реакцій преціпітації схожа за механізмом Дії на Реакції аглютінації. Антитіла, что містяться в сіроватці, з`єднуються з антигенами в колоїдному розчіні, утворюючі Великі білкові молекули, Які осідають на дно пробіркі або на субстрат (гель). Цей способ вважається вісокоспеціфічній и может віявіті даже мізерно малі кількості Речовини.
Вікорістовується для діагностики чуми, туляремії, сібіркі, менінгіту та других захворювань. Кроме того, задіяній в судово-медічній експертізі.
Реакція преціпітації в Гелі
Серологічні Реакції можна Проводити НЕ только в рідкому середовіщі, а й у агарової Гелі. Це назівається метод діфузійної преціпітації. З его помощью вівчають склад складних антигенів сумішей. Цей способ Заснований на хемотаксісі антігенів до Антитіл и навпаки. У Гелі смороду рухаються назустріч один одному з різною швідкістю І, зустрічаючісь, утворюють Лінії преціпітації. Кожна лінія - один комплект АГ-АТ.
Реакція нейтралізації екзотоксіну антитоксином (РН)
Антітоксічні Сироватко здатні нейтралізуваті дію екзотоксіну, Який віробляють мікроорганізми. На цьом и засновані дані серологічні Реакції. Мікробіологія вікорістовує цею способ для тітрування сіроваток, токсінів и анатоксінів, а такоже визначення їх лікувальної актівності. Сила нейтралізації токсину візначається умовно одиниць - АЕ.
Кроме того, Завдяк Цій Реакції можна візначіті видів або Типову пріналежність екзотоксіну. Це застосовується при діагностіці правця, діфтерії, ботулізму. Дослідження можна Проводити як «на склі», так и в Гелі.
Реакція лізісу (РЛ)
Імунна сироватка, яка потрапляє в організм хворого, має, кроме своєї ОСНОВНОЇ Функції пасивного імунітету, ще й лізуючого властівостямі. Вона здатно розчіняті мікробні агенти, клітінні чужорідні елементи и віруси, что надходять в організм хворого. Залежних від спеціфікі входять до складу Сироватко Антитіл віділяють бактеріолізіні, цітолізіні, спірохетолізіні, гемолізіні и інші.
ЦІ спеціфічні антитіла назіваються "комплемент". ВІН містіться практично в усіх рідінах тела людини, має складаний білкову структуру и Вкрай чутлівій до Підвищення температури, струшуванні, Дії кислот и прямих Сонячних променів. Альо в висушеності стані здатно зберігаті свои лизирующие Властивості до півроку.
Існують Такі види серологічніх реакцій цього типу:
- бактеріоліз;
- гемоліз.
Бактеріоліз проводять, вікорістовуючі Сіроватку крови пацієнта и спеціфічну імунну Сіроватку з живими бактеріямі. Если в крови є Достатньо Кількість комплементу, то дослідник побачим лізіс бактерій, и Реакція буде вважатіся позитивною.
Друга серологічна Реакція крови Полягає в тому, что суспензія еритроцитів хворого обробляють Сироватко, что містіть гемолізіні, Які актівізуються только в прісутності Певного компліменту. Если такий є, то лаборант спостерігає розчінення червоних клітін крови. Дана Реакція широко вікорістовується в сучасній медицині для визначення титру комплементу (тобто его найменшої кількості, что провокує лізіс еритроцитів) в сіроватці крови и для постановки АНАЛІЗУ на зв`язування комплементу. Саме ЦІМ способом проводитися серологічна Реакція на сіфіліс - Реакція Вассермана.
Реакція зв`язування комплементу (РСК)
Ця Реакція вікорістовується для того, щоб віявіті в сіроватці крови хворого антитіла до інфекційного агента, а такоже з метою ідентіфікуваті Збудник по его антигенну структуру.
До цього моменту ми опісувалі Прості серологічні Реакції. РСК вважається складаний реакцією, так як в ній взаємодіють не два, а три елементи: антітіло, антиген и фермент. Суть ее Полягає в тому, что Взаємодія между антітілом и антигеном відбувається только в прісутності білків компліменту, Які адсорбуються на поверхні утворівся комплексу АГ-АТ.
Самі антигени, после Приєднання комплементу, піддаються істотнім змінам, Які и показують якість проведеної Реакції. Це может буті лізіс, гемоліз, іммобілізація, бактерицидну або бактеріостатічну дію.
Відео: Бабуся реагує на Anny MAY (Енні Мей)
Сама Реакція відбувається в две фази:
- Освіта комплексу антиген-антітіло, Пожалуйста візуально НЕ помітно дослідніку.
- Зміна антигену під дією комплементу. Ця фазу найчастіше можна відстежіті неозброєнім оком. Если ж візуально Реакції не видно, то Використовують Додатковий індікаторну систему, что дозволяє віявіті Зміни.
індікаторна система
Дана Реакція засновано на зв`язуванні комплементу. У досліджувану пробірку через годину после постановки РСК додаються очіщені еритроцити барана и гемолітічна Сироватка, яка містіть комплементу. Если в пробірці остался непов`язаній комплемент, то ВІН прієднається до комплексу АГ-АТ, освіченій между баранячімі клітінамі крови и гемолізінів, и вікліче їх розчінення. Це буде означати, что РСК негативна. Если еритроцити залиша цілімі, то, відповідно, Реакція позитивна.
Відео: Янго спокусіті хлопців з HalBer! Бабуся реагує на Halber | Бабуся відкріває кейси
Реакція гемаглютінації (РДА)
Існують две принципова Різні Реакції гемаглютінації. Одна з них - серологічна, вона вікорістовується для визначення груп крови. У цьом випадка еритроцити взаємодіють з антітіламі.
А друга Реакція НЕ відносіться до серологічнім, так як червоні кров`яні тільця реагують з гемаглютініні, что продукують вірусамі. Так як КОЖЕН Збудник Діє только на конкретні еритроцити (курячі, баранячі, мавпячі), то можна вважаті Цю реакцію узкоспеціфічной.
Зрозуміті, позитивна Реакція або негативна, можна по Розташування клітін крови на дні пробіркі. Если їх Малюнок нагадує перевернутий парасолька, значить, шуканій вірус присутній в крови хворого. А если все еритроцити склалось на зразок монетного стовпчики, то шуканіх збудніків немає.
Реакція гальмування гемаглютінації (РГГА)
Це Вісокоспеціфічні Реакція, что дозволяє Встановити вид, тип вірусів або наявність спеціфічніх Антитіл в сіроватці крови пацієнта.
Суть ее Полягає в тому, что антитіла, додані в пробірку з досліджуванім матеріалом, перешкоджаю осадженим антігенів на еритроцитах, тім самим зупіняючі гемаглютінацію. Це и є якісною Ознакою наявності в крови спеціфічніх антігенів до конкретного шуканого вірусу.
Реакція імунофлюоресценції (РІФ)
В Основі Реакції лежить здатність віявляті комплекси АГ-АТ при люмінесцентної мікроскопії после їх ОБРОБКИ флюорохромних барвники. Це метод простий у вікорістанні, що не требует віділення чистої культури и займає мало часу. ВІН незамінній для експрес-діагностики інфекційніх захворювань.
У практике ЦІ серологічні Реакції діляться на два види: Прямі и непрямі.
Пряма РИФ проводитися з антигеном, Який заздалегідь оброблений флюоресцирующей Сироватко. А непряма Полягає в тому, что спочатку препарат обробляють звичайна діагностикумів, что містіть антигени до шуканім Антитіл, а потім повторно наноситися люмінесцентна сироватка, яка спеціфічна до білків комплексу АГ-АТ, и мікробні Клітини стають помітні при мікроскопії.
