Бактеріологічне дослідження: алгоритм, методика, цілі, етапи

Що собою являє бактеріологічне дослідження? За якою схемою воно проводиться? Що розуміється під технікою безпеки в даному випадку? Які цілі і етапи бактеріологічного дослідження існують?

Загальна інформація

Бактеріологічне дослідження - це науковий процес, в рамках якого виявляються бактерії і вивчаються їх властивості з метою постановки мікробіологічного діагнозу. Величезне значення тут має визначення типової або видової приналежності отриманого мікроорганізму (мається на увазі чиста культура). Це супроводжується вивченням біохімічних і фізіологічних властивостей організмів, а також схильності до токсінообразованію. Для цих цілей використовуються реакції преципітації і аглютинації. Також практикується зараження лабораторних тварин з подальшим виявленням патологічних змін.

Робота з досліджуваним матеріалом

Алгоритм бактеріологічного дослідження передбачає неухильне дотримання спеціальної інструкції. Так, досліджуваний матеріал необхідно збирати в стерильну посуд в асептичних умовах. Також необхідно подбати про те, щоб доставка в лабораторію здійснювалася якнайшвидше. Бажаним є зберігання проб в холоді. Методика бактеріологічного дослідження передбачає багато можливих ситуацій. Так, тип об`єкта, властивості мікроорганізму і характер захворювання змушують часто розробляти індивідуальні інструкції для роботи. В роботі використовується велика кількість різних методів. Один з найпоширеніших - це бактеріоскопія. Але якщо бактерії нефіксовані, то використовують розчавлену або висячу краплю. Слід зазначити, що два останні варіанти відрізняються підвищеним рівнем заразність.

Відео: gypsy hypnosis

бактериоскопия

В даному випадку використовуються мазки. Для їх створення потрібно краплю рідини, яка досліджується, розподілити по поверхні предметного скла. Затес слід висушити її. Для цього часто використовують переміщення препарату через полум`я, що отримується від газового пальника. Хоча в якості альтернативи можуть використовувати фіксують склади. Щоб позначити, що з даним препаратом підготовчі дії проведені, його фарбують. Мета подібної маніпуляції - точність, що дуже важливо, коли проводиться мікроскопічне і бактеріологічне дослідження. Адже якщо повторно використовувати препарат для іншої мети, вийде каша, ефективно працювати з якою буде дуже складно.

Чому бактериоскопия так популярна

Не в останню чергу це обумовлено доступністю даного методу. Якщо проводиться бактеріологічне дослідження свіжого препарату, то для визначення патогена можуть використовуватися мікрохімічні реакції або виборча забарвлення різних структурних частин мікроорганізму. Що з них краще? Більш точний результат можна отримати при роботі з пофарбованим препаратом. В цьому випадку досліджуваний матеріал наносять на заздалегідь підготовлене предметно скло. Причому обов`язково тонким (а при можливості і рівним) шаром. Після цього необхідно почекати, поки препарат висохне на повітрі. Потім мікроорганізми фіксують за допомогою одного з загальноприйнятих методів. Після цього остуджений препарат піддають фарбуванню диференціальної або простий фарбою. Для цього можуть використовуватися сухі і нативні препарати. Після цього залишається направити на місце скупчення організмів ультрафіолетові або короткі сині промені, що викликає світіння всього мікроба або окремих ділянок його тіла.

Відео: Бронхоскопія з забором мокротиння для бак.посева.

Практичне застосування бактеріоскопії

Вона використовується для того, щоб діагностувати ряд інфекційних захворювань. Найвідомішими з них є туберкульоз, гонорея і поворотний тиф. Крім цього, до дослідження вдаються, щоб вивчати весь комплекс мікрофлори органу або продукту. Але критики часто вказують на відносну ненадійність і неточність даного методу.

Посіви і пересівання бактеріальних культур

Здійснюють їх з використанням пастерівської піпетки. Проведення бактеріологічного і цитологічного дослідження часто буває складно здійснити без посіву і пересіву під час робочого процесу. Коли робота ведеться з пастерівської піпеткою, то її кінчик обламується за допомогою пінцета. Сам інструмент після цього проносять через полум`я пальника і після цього дають йому охолонути. До речі, при посівах можуть використовуватися як рідкі, так і тверді поживні середовища. Вплив на вибір надає те, які цілі бактеріологічного дослідження переслідуються. При цьому необхідно дотримуватися алгоритму роботи і техніки безпеки. Так, при роботі з рідким живильним середовищем необхідно стежити, щоб вона не вилилася і не змочила краю пробки і пробірок. Коли дослідження ведеться з твердим матеріалом, то часто використовують особливу голку для занесення культури. Коли проводяться посіви і пересівання, вони повинні здійснюватися близько полум`я газового пальника. Для чистоти експерименту пробірка не повинна довго залишатися відкритою. Щодо інструменту з культурою: слід простежити, щоб він ні до чого не торкався. Також техніка бактеріологічного дослідження передбачає прожиг країв пробірки перед її закриттям. Уже готовий препарат слід одразу ж після виготовлення підписати, щоб уникнути в майбутньому плутанини.

результативність посіву

Вважається, що цей метод дозволяє отримувати більш точні та надійні дані під час бактеріологічної діагностики, ніж розглянута раніше бактериоскопия. У цьому випадку алгоритм дій такий:

1. Спочатку чисту культуру розмазують по поверхні живильного середовища, яка налита в чашку Петрі.
2. Початковий посів необхідно проводити в умовах, які є сприятливими для даного виду мікроорганізмів.
3. Через добу-другу при наявності оптимального середовища все підходящі колонії переселяються туди, де вони зможуть по максимуму розвиватися. Це звільняє їх, таким чином, від сторонньої мікрофлори.

Кінцевий результат - це культура однорідних бактерій, які можна ідентифікувати.

Відео: Зигмунд Фрейд - Про психоаналізі (лекції)

чисті культури

А ось як вони виходять? Для цього використовуються біологічні і механічні методи. У першому випадку велику роль відіграють поживні середовища, де є необхідні умови, сприятливі для розвитку певної культури. Також може використовуватися підхід, коли заражаються лабораторні тварини, чутливі до певного виду бактерій. Механічні методи базуються на використанні стерильного інструменту, за допомогою якого культура поміщається в живильне середовище, що знаходиться в першій, другій і третій чашках Петрі. Потім необхідно почекати, поки виростуть окремі колонії, і з них вже буде виділятися чиста культура. Також вирощуватися бактерії можуть в спеціальних термостатах, де підтримується температура певного рівня (зазвичай близько 37 градусів). У такому випадку процес триває близько доби. Але, в залежності від виду мікроорганізмів, можуть встановлюватися й інші терміни. Також важливим є наявність необхідної концентрації кисню. Для цього використовують різні методи аерації. До сих пір ми говорили про ситуацію в цілому і загальному, а зараз давайте зосередимо свою увагу на тому, що собою являє схема бактеріологічного дослідження.

Відео: Перші 150 тис. Людина-продаж

Практика

Комплекс методів часто використовується для того, щоб виявляти патогенні мікроорганізми в тілі хворого або потенційного носія. Використовувані матеріали і методи залежать від того, які цілі переслідує аналіз, а також від умови середовища, в якій ведеться робота. На практиці найчастіше бактерії виявляються завдяки проведенню посіву крові, взятої у людини або тварини. Якщо добре виражені місцеві ураження, патогени можна шукати в проблемних місцях. Це характерно для таких недуг, як дизентерія, гонорея, дифтерія, і ряду їм подібних. В особливо важких випадках цей процес розбивається на окремі етапи бактеріологічного дослідження (що характерно для черевного тифу). На кожному з них використовуються свої методи, які спрямовані на пошук причини зараження. Давайте більш детально розглянемо ситуацію з черевним тифом. На першому тижні захворювання найбільш достовірним способом діагностування хвороби є посів крові. На другий таким вважається серологічне дослідження. На третього тижня досліджують випорожнення. Останнім методом вважається перевірка реконвалесцентів.

ідентифікація мікроорганізму

Вона починається з процесу його фарбування. Потім дивляться, як бактерія може розщеплювати вуглеводи, амінокислоти і так далі. Додатково цей процес може бути доповнений вивченням інших властивостей, якими володіє кожна окрема рід або вид мікроорганізмів. Як приклад слід привести можливості розчинення еритроцитів різних тварин, вплив на згортання плазми крові і розчинення згустку фібрину і так далі. Все це є диференціальними ознаками окремих представників мікросвіту. Також для остаточного розпізнавання може використовуватися серологічна ідентифікація (але це, як правило, стосується патогенних бактерій, що належать до сімейства кишкових).

висновок

Слід зазначити, що ряд мікроорганізмів неможливо ідентифікувати описаними в статті способами. В такому випадку широко використовується практика зараження лабораторних тварин. Розрахунок робиться на те, що проявиться характерна токсигенность або патогенність, яка не спостерігається в штучних умовах. Також зараження може бути використано в якості методу накопичення патогенних мікробів. І вже коли зіставлені характеристики досліджуваної культури, виявлені в процесі вивчення біологічних, морфологічних, серологічних та біохімічних властивостей, можна говорити про те, що відомо, з яким видом мікробів ми маємо справу. Під ідентифікацією розуміють вказівку роду, виду і типу бактерії. Якщо досліджуваний мікроорганізм відхиляється в певних властивостях від своєї типової характеристики, то це слід обов`язково вказати. Ряд фахівців вважає, що в таких випадках корисним буде проведення повторної ідентифікації з дублюванням всіх використовуваних методів і прийомів. Іноді дослідження можуть бути перенесені на новий рівень, який має на увазі більш серйозний підхід (і більш дорогий). Якщо були отримані негативні результати, то це говорить про те, що в препараті мікроорганізми були відсутні або вони були нежиттєздатні. Але для точності досліджень при підозрі на ряд бацилоносіїв (дизентерія, дифтерія, черевний тиф) в таких випадках показані повторні перевірки. Це потрібно для того, щоб фахівці мали точне уявлення про те, з чим доводиться мати справу.